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產(chǎn)品展示
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超純?nèi)俁NA快速提取試劑盒

  • 型   號:91215
  • 價   格:
  • 更新時間:2025-04-18
  • 廠家性質(zhì):經(jīng)銷商

適用于快速提取新鮮血液的總RNA,RNA可直接用于RT,RT-PCR,RT-qPCR,普通轉(zhuǎn)錄組測序、RACE等。
超純?nèi)俁NA快速提取試劑盒

FlashPure Blood Total RNA Mini Kit

超純?nèi)?/span> RNA 提取試劑盒(離心柱型)


超純?nèi)俁NA快速提取試劑盒

目錄號:91215

產(chǎn)品內(nèi)容

產(chǎn)品成份

91215-50(50 次)

10X 紅細胞裂解液 RLB

25 ml

裂解液 RL

50 ml

去蛋白液 RE

25 ml

漂洗液 RW

10 ml(需加入指ding量無水乙醇)

70%乙醇

9 ml(需加入指ding量無水乙醇)

RNase-Free H2O

10 ml

RNA 吸附柱和收集管

50 套

RNase-Free 1.5ml 離心管

50 支

自備試劑

無水乙醇、β-巰基乙醇

保存條件

室溫(15 ~ 25℃)下,存放 12 個月,不影響使用效果。

產(chǎn)品簡介

適用于快速提取新鮮血液的總RNA,RNA可直接用于RT,RT-PCR,RT-qPCR,普通轉(zhuǎn)錄組測序、RACE等。

產(chǎn)品特點

1. 高質(zhì):28s/18s=2:1,OD260/280=2.0~2.2!

2. 高效:提取全過程僅需 20 min!

操作步驟

提示:

所有離心步驟均需要在室溫(15 ~37℃)下進行。

②第一次使用前,請先在漂洗液 RW 和 70%乙醇中加入指ding量無水乙醇。

③操作前,先用 RNase-Free H2O 將 10X 紅細胞裂解液 RLB 稀釋到 1X。

1. 在適合大小的 RNase free 離心管中加入 1 體積(0.5-1 ml)各種抗凝劑新鮮血液 (先顛倒混勻后)和 3 體積的紅細胞裂解液 RLB,顛倒混勻,可輕彈管壁,確?;靹?。

2. 室溫放置 10 分鐘(期間應該顛倒輕彈混勻數(shù)次幫助裂解紅細胞)。

注意:如果 RNA 降解嚴重,可在冰上裂解,時間可以長一些以充分裂解。

3. 12,000 rpm 離心 20 秒,倒棄紅色上清,并小心的盡可能多的吸棄上清

(注意不要吸到管底的細胞團),留下完整的管底白細胞團。

注意:離心后在管底應該見到白色的白細胞團,也可能有一些紅細胞殘片和白細胞團在一起,但是如果看到的是大部分的紅色細胞團,說明紅細胞裂解很不充分,應該再加入紅細胞裂解液,重懸后重復步驟 2,3。

注意:上清盡可能che底吸棄,殘留過多會稀釋裂解液,造成裂解異常,產(chǎn)量純度降低。

4. 渦旋或者輕彈管壁將白細胞沉淀wan全松散重懸,加入 1 ml 裂解液 RL,用移液槍反復吹打,充分裂解細胞。

5. 將勻漿樣品劇烈震蕩混勻,在室溫(15 -30℃)條件下孵育 5 min,使得核酸蛋白復合物wan全分離。

6. 每1 ml裂解液 RL 加 0.2 ml 氯仿,蓋緊樣品管蓋,劇烈振蕩 15 sec,并在室溫下放置2min。

7. 12,000rpm 離心 10 min,樣品會分成三層:下層有機相,中間層和上層無色的水相,RNA 存在于水相中。水相層的容量大約為所加 RL 體積的 60%,把水相轉(zhuǎn)移到新管中,進行下一步操作。

8. 向水相中加入等體積 70%乙醇,吹打混勻。

9. 每次轉(zhuǎn)移≤700 μl 水相混合物至一個 RNA 吸附柱中(吸附柱放入收集管中),13,000 rpm 離心1 min,RNA 被吸附在膜上,棄濾液。重復此過程,直到溶液全部上柱。

10. 加500μl去蛋白液 RE,室溫放置 1 min,13,000 rpm 離心 30 sec,棄濾液。

11. 加入500μl漂洗液RW,13,000 rpm 離心 30 sec,棄濾液。

12. 重復步驟 11。

13. RNA 吸附柱放回收集管中,13,000 rpm 離心 2 min,che底除去膜上殘留的乙醇。

14. 取出 RNA 吸附柱,放入一個新的 1.5 ml RNase - free 離心管中,向吸附膜的中央部位懸空滴加30-50μl RNase free H2O(事先在70-90℃水浴中加熱可提高產(chǎn)量),室溫放置1min,13,000 rpm 離心1 min,管底即是RNA溶液。

15. 提取的RNA可直接用于下游實驗,或于-70℃保存,避免 RNA 降解。

相關產(chǎn)品:

71118-100 Script III 1st Strand cDNA Synthesis Kit(for PCR or qPCR)

71710-100 Script III All-in-one RT Mix with dsDNase(for qPCR)

71600-500 2x Universal SYBR Green qPCR Mix (適用于所有qPCR儀)


超純?nèi)俁NA快速提取試劑盒

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