高效植物總RNA提取試劑盒 核酸提取
適用于快速提取各種植物根、莖、葉、花的總RNA，gDNA過(guò)濾器能高效濾除gDNA，RNA可直接用于RT，RT-PCR，RT-qPCR，普通轉(zhuǎn)錄組測(cè)序、RACE、芯片等。高效植物總RNA提取試劑盒 核酸提取
高效植物總 RNA 提取試劑盒
FlashPure Plus Plant Total RNA Mini Kit
高效植物總RNA提取試劑盒 核酸提取
目錄號(hào)：91452
產(chǎn)品內(nèi)容
產(chǎn)品成份 | 91452-50（50 次） |
裂解液 PAL Plus | 30 ml |
去蛋白液 RW1 | 40 ml |
漂洗液 RW | 10 ml（需加入指ding量無(wú)水乙醇） |
RNase-Free H2O | 10 ml |
DNA 清除和 RNA 吸附通用柱 | 100 套 |
RNase-Free 1.5ml 離心管 | 50 支 |
自備試劑
無(wú)水乙醇
保存條件
室溫（15 ~ 25℃）
產(chǎn)品簡(jiǎn)介
適用于快速提取各種植物根、莖、葉、花的總RNA，gDNA過(guò)濾器能高效濾除gDNA，RNA可直接用于RT，RT-PCR，RT-qPCR，普通轉(zhuǎn)錄組測(cè)序、RACE、芯片等。
本試劑盒是同類(lèi)產(chǎn)品中適應(yīng)性zui廣泛，不但可以提取小麥、玉米、水稻、大豆、番茄、煙草、擬南芥等簡(jiǎn)單植物，也可以提取茶樹(shù)葉片、棉花葉片、葡萄葉片、楊樹(shù)葉片、番薯葉片、花生葉片、香蕉葉片、荔枝葉片、白松葉片等多糖多酚含量一般的植物。
如果遇到果實(shí)、種子、中草藥，例如：多糖多酚巨高的作物種子（小麥/玉米/大豆/水稻）、葡萄果實(shí)、藍(lán)莓果實(shí)、百合鱗莖、土豆塊莖；或者次級(jí)代謝產(chǎn)物巨豐富的葛根、虎杖、雪蓮等藥用植物，請(qǐng)選擇91513-果實(shí)種子總RNA提取試劑盒。
產(chǎn)品特點(diǎn)
1. 無(wú)毒：免氯仿、免β-巰基乙醇！
2. 高質(zhì)：28s/18s=2:1，OD260/280=2.0～2.2！
3. 高效：提取全過(guò)程僅需 20min！
重要提示：
a. 第一次使用前請(qǐng)先在漂洗液RW中加入指ding量無(wú)水乙醇，詳見(jiàn)瓶身的標(biāo)簽。
b. 所有離心步驟均需要在室溫（15 ~25℃）下進(jìn)行。
具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)的參數(shù)為準(zhǔn)
操作步驟：
1. 材料處理：
a．在液氮中研磨植物組織成細(xì)粉，取 50 ~ 100 mg 細(xì)粉加入 600 μl裂解液 PAL Plus，立即劇烈渦旋震蕩 30 sec，充分混勻。
b．將裂解物 13,000 rpm 離心 5 ~ 10 min，沉淀不能裂解的碎片。
2. 小心吸取 500 μl 上清轉(zhuǎn)入一個(gè) DNA 清除和 RNA 吸附通用柱（以下簡(jiǎn)稱通用柱），13,000 rpm 離心 1 min，DNA 被吸附在膜上，丟棄帶吸附膜的內(nèi)柱，保留濾液（RNA 在濾液中）。
3. 向?yàn)V液中加入 0.5 倍體積 (一般 250 μl ) 的無(wú)水乙醇，吹打混勻。
4. 轉(zhuǎn)移濾液混合物至一個(gè)新的通用柱中（通用柱已放入收集管中），13,000rpm離心1 min，倒棄濾液。此時(shí)，RNA被吸附在膜上。
5. 加入700μl去蛋白液RW1，室溫放置1min，13,000rpm離心30sec，倒棄濾液。
6. 加入500μl漂洗液 RW，13,000rpm離心30sec，倒棄濾液。
7. 重復(fù)步驟 6。
8. 將通用柱放回空收集管中，13,000 rpm 離心 2 min，除去膜上殘留的乙醇。
9. 取出通用柱的內(nèi)柱，放入 1.5ml RNase-free 離心管中，向吸附膜的中央懸空滴加 30-50μl RNase-free H2O，室溫放置 1 min，13,000 rpm 離心 1 min。
10. 提取的總 RNA，可直接用于下游實(shí)驗(yàn)，或于-70℃保存，以免降解。
相關(guān)產(chǎn)品：
71118-100 Script III 1st Strand cDNA Synthesis Kit（for PCR or qPCR）
71710-100 Script III All-in-one RT Mix with dsDNase（for qPCR）
71600-500 2x Universal SYBR Green qPCR Mix (適用于所有 qPCR 儀)
附錄：
一、免液氮直接研磨（自動(dòng)研磨儀）—— 適用于新鮮樣本
a. 在 2.0 ml 液氮研磨管中放入2粒4 mm 的鋼珠，加入600 μl 裂解液 PAL Plus，放入≤60 mg 樣本，設(shè)置65個(gè)頻率，震蕩 2 min。
b. 將裂解物 13,000 rpm 離心 5 – 10 min，沉淀不能裂解的碎片。
二、液氮研磨（自動(dòng)研磨儀）—— 適用于各種樣本，尤其是富含糖酚含或
易降解的樣本
a. 在2.0 ml液氮研磨管中放入3 mm鋼珠3粒，放進(jìn)≤50 mg 樣本，投入液氮中預(yù)冷。把研磨模塊也丟到液氮中預(yù)冷，直到?jīng)]有氣泡冒出視為預(yù)冷完畢。
b. 把預(yù)冷好的離心管插入研磨模塊中，放進(jìn)研磨儀，設(shè)置55個(gè)頻率，震蕩 30 - 60 sec。（以北京赫得京 N9548 為例）
c. 研磨完成后，馬上加 500μl 裂解液 PRL 和 50μl 糖分去除劑 PAD，劇烈渦旋 30 sec。
d. 將裂解物 13,000 rpm 離心 5 - 10 min，沉淀不能裂解的碎片。
高效植物總RNA提取試劑盒 核酸提取
