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凱杰Qiagen無內*素宏量質粒提取試劑盒5T

• 型   號：12381
• 價   格：
• 更新時間：2024-09-02
• 廠家性質：經銷商

12381 凱杰Qiagen無內*素宏量質粒提取試劑盒5T EndoFree Plasmid Mega Kit ，產品介紹：
產品品牌：Qiagen
產品貨號：12381
產品名稱：無內*素宏量質粒提取試劑盒
英文名稱：EndoFree Plasmid Mega Kit
產品規(guī)格：5T

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凱杰Qiagen12381無內*素宏量質粒提取試劑盒EndoFree Plasmid Mega Kit 5T

凱杰QIAGEN作為創(chuàng)新市場和技術的領dao者，憑借強大的樣本制備和分析技術，實現各種生物樣本內容物的高品質純化、分析。我們致力于幫助客戶在生命科學研究、應用檢測、制藥、和分子診斷領域獲得成功和突破性進展。由此讓生活的改善成為可能。我們秉承市場、客戶、病患至上的理念，不斷推進多領域的創(chuàng)新和發(fā)展，充分發(fā)揮我們的樣本制備和分析技術專長

我們北京諾博萊德科技有限公司作為QIAGEN公司的特約經銷商為客戶提供，正規(guī)進口，貨期穩(wěn)定，折扣好的服務標準。

12381 凱杰Qiagen無內*素宏量質粒提取試劑盒5T EndoFree Plasmid Mega Kit ，產品介紹：
產品品牌：Qiagen
產品貨號：12381
產品名稱：無內*素宏量質粒提取試劑盒
英文名稱：EndoFree Plasmid Mega Kit
產品規(guī)格：5T

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12381 凱杰Qiagen無內*素宏量質粒提取試劑盒5T EndoFree Plasmid Mega Kit ，產品說明：

特征

• 達到小于 0.1 EU/μg DNA

• 綜合內*素去除

• 高拷貝質粒 DNA 的高產量

• LyseBlue      可實現*佳裂解和*大 DNA 產量

產品詳情

無內切質粒試劑盒提供基于陰離子交換的快速無內毒素質粒 DNA 純化。QIA過濾器濾芯可通過過濾快速清除裂解物。純化的DNA純度超過2 x CsCl梯度離心獲得的純度，適用于高級轉染級應用。EndoFree質粒緩沖液組合可用于制備10 mega或5 giga轉染級質粒或cosmid DNA制劑。

Performance

EndoFree質粒試劑盒將高效的內毒素去除步驟集成到質粒純化程序中——無需額外的提取或親和柱來去除脂多糖。細菌裂解物通過QIAfilterMega-Giga或Maxi濾芯過濾進行清除，質粒DNA在含有陰離子交換樹脂的重力流QIAGEN尖duan上純化。從培養(yǎng)物中純化 DNA 可獲得高達 10 mg （giga）、2.5 mg（兆）和 500 μg（*大）的純化 DNA（培養(yǎng)體積取決于質粒拷貝數、插入片段大小、宿主菌株和培養(yǎng)基）。純化的DNA不含內*素（<0.1 EU/μg DNA）。

對于低拷貝質粒和cosmid的純化，由于所需的培養(yǎng)體積大且QIAfilter超千兆質粒試劑盒的容量有限，因此EndoFree質粒Mega試劑盒是比EndoFree Giga質粒試劑盒更好的選擇。

無內切質粒試劑盒可去除裂解步驟中釋放的細菌內*素，并影響DNA轉染到原代細胞和敏感培養(yǎng)細胞中。從EndoFree質粒試劑盒獲得的無內*素DNA非常適合在轉染中獲得可重復且可靠的結果。QIAGEN超純無內*素DNA也適用于基因治療研究和其他敏感應用。

質粒制劑中的內*素水平*

EndoFree DNA可提高原代細胞的轉染效率*

*原代兔胃壁細胞轉染用按所示方法制備的pEGFP-N2（CLONTECH）。使用Effectene轉染試劑進行轉染。數據表示表達GFP的細胞百分比，通過對轉染后48小時的綠色熒光細胞數量進行評分來確定。每種純化方法的轉染效率代表來自6種以上不同DNA制備的9至2個重復培養(yǎng)皿的平均效率。（數據由美國佐治亞州奧古斯塔佐治亞醫(yī)學院分子醫(yī)學和遺傳學系 C. Chew 和 J. Parente 提供。

Principle

純化質粒DNA中的內毒素污染水平取決于所使用的純化方法。二氧化*漿液純化的DNA表現出ji高的內*素水平。QIAGEN、QIAfilter和HiSpeed質粒試劑盒以及2x CsCl超速離心可產生非常純的DNA，內*素水平相對較低。EndoFree 質粒試劑盒包括一個集成的內*素去除步驟，可產生含有 <0.1 EU/μg 質粒 DNA 的質粒 DNA。

QIAfilter試劑盒以QIAfilter、HiSpeed和EndoFree質粒試劑盒形式提供，是特殊的過濾裝置，旨在取代細*細胞堿性裂解后的離心。QIAfilter濾芯可wan全去除SDS沉淀物并清除細*裂解物，所需時間僅為離心所需時間的一小部分，從而將質粒純化時間縮短多達1小時。QIAfilter超級千兆濾芯在室內真空下運行，以*小的努力有效地清除大量細菌裂解物（請注意，瓶子不包括在套件中）。QIAfilter Maxi 濾芯具有注射器形式，通過將液體推入過濾器，可在幾秒鐘內清除裂解物。

QIAGEN-tips中du特的陰離子交換樹脂專為核酸純化而開發(fā)。其zhuo越的分離特性使DNA純度等于或優(yōu)于連續(xù)兩輪CsCl梯度離心獲得的DNA純度。預包裝的QIAGEN吸頭通過重力流運行，永bu干涸，*大限度地減少了質粒制備所需的手動操作時間。整個QIAGEN質粒純化系統避免使用ben酚、氯仿、溴化乙錠和氯化銫等有*物質，*大限度地減少對用戶和環(huán)境的危害。

內*素，也稱為脂多糖或LPS，是大腸桿菌等革蘭氏陰性細菌的細胞膜成分。內*素在質粒純化的裂解步驟中釋放，并顯著降低內*素敏感細胞系的轉染效率。此外，內毒素可以通過與DNA競爭“游離"轉染試劑來影響轉染實驗中質粒DNA的攝取。內毒素還會誘導巨噬細胞和B細胞等免疫細胞中免疫應答的非特異性激活，從而導致對轉染結果的誤解。這些反應包括誘導蛋白質和脂質的合成，如IL-1和前列腺素。總體而言，內*素是轉染實驗設置中不可控的變量，會影響結果和結果的可重復性，使其難以比較和解釋。在基因治療研究中，內毒素可以通過引起內毒性休克綜合征和補體級聯反應的激活來干擾。

Procedure

細菌細胞在堿性條件下裂解，并使用QIAfilter濾芯清除粗裂解物。在此階段，將內*素去除緩沖液添加到過濾后的裂解物中，在冰上孵育。然后將澄清的裂解物加載到陰離子交換尖duan，質粒DNA在適當的低鹽和pH條件下選擇性結合。通過中鹽洗滌除去RNA、蛋白質、代謝物和其他低分子量雜質，并在高鹽緩沖液中洗脫超純質粒DNA。DNA通過異丙醇沉淀濃縮和脫鹽，并通過離心收集。

Applications

使用無內切質粒試劑盒純化的DNA適用于任何敏感應用，包括：

l  轉染，包括原代細胞、敏感細胞和懸浮細胞

l  基因治療研究

l  基因沉默

l  注射

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