Hoechst 33258染色液 NobleRyder C0300
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Hoechst 33258染色液 NobleRyder C0300
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Hoechst 33258，也稱(chēng)bisBenzimide H 33258或HOE 33258。分子式為C25H24N6O·3HCl，分子量為533.88，CAS Number 23491-45-4。
Hoechst 33258是一種可以穿透細(xì)胞膜的藍(lán)色熒光染料，對(duì)細(xì)胞的毒性較低。
Hoechst 33258染色常用于細(xì)胞凋亡檢測(cè)，染色后用熒光顯微鏡觀察或流式細(xì)胞儀檢測(cè)。Hoechst 33258也常用于普通的細(xì)胞核染色，或常規(guī)的DNA染色。
Hoechst 33258的zui大激發(fā)波長(zhǎng)為346nm，zui大發(fā)射波長(zhǎng)為460nm；Hoechst 33258和雙鏈DNA結(jié)合后，zui大激發(fā)波長(zhǎng)為352nm，zui大發(fā)射波長(zhǎng)為461nm。
| 試劑盒組成 | 規(guī)格 | 保存條件 |
| Hoechst 33258濃縮液（50X） | 1ml | |
| Hoechst 33258稀釋液 | 50ml | 2 |
此染色液做成濃縮液和稀釋液主要是為了使用方便，因?yàn)闈饪s液才1ml,解凍起來(lái)很快，實(shí)際也可以一次將濃縮液都加入稀釋液中，混勻使用。但如果一次使用量比較少，使用次數(shù)比較多，是適當(dāng)分裝一下，免得多次凍融。
使用說(shuō)明：
Hoechst 33258染色液染色液的配制：將Hoechst 33258濃縮液取出解凍，輕輕混勻，短時(shí)間離心，根據(jù)使用量，按照1ml33258稀釋液加入20ul33258濃縮液的比例配制，即成Hoechst 33258染色液。此配好的染色液深度為10ug/ml,如果感覺(jué)染色顏色比較深，可適當(dāng)?shù)南♂專(zhuān)ㄓ孟♂屢海?。此配好的染色液未用完可存放?/span>
1. 對(duì)于固定的細(xì)胞或組織：
a. 對(duì)于細(xì)胞或組織樣品，固定后，適當(dāng)洗滌去除固定劑。隨后如果需要進(jìn)行免疫熒光染色，則*行免疫熒光染色，染色完畢后再按后續(xù)步驟進(jìn)行Hoechst 33258染色。如果不需要進(jìn)行其它染色，則直接進(jìn)行后續(xù)的Hoechst 33258染色。
b. 對(duì)于貼壁細(xì)胞或組織切片，加入少量Hoechst 33258染色液，覆蓋住樣品即可。對(duì)于懸浮細(xì)胞，至少加入待染色樣品體積3倍的染色液，混勻。室溫放置3-5分鐘。
c. 吸除Hoechst 33258染色液，用TBST、PBS或生理鹽水洗滌2-3次，每次3-5分鐘。
d. 直接在熒光顯微鏡下觀察或封片后熒光顯微鏡下觀察。細(xì)胞發(fā)生凋亡時(shí)，會(huì)看到凋亡細(xì)胞的細(xì)胞核呈致密濃染，或呈碎塊狀致密濃染。
2. 對(duì)于活細(xì)胞或組織：
a. 加入適當(dāng)量Hoechst 33258染色液，必須充分覆蓋住待染色的樣品，通常對(duì)于六孔板一個(gè)孔需加入1ml染色液，對(duì)于96孔板一個(gè)孔需加入100微升染色液。
b. 在適宜于細(xì)胞培養(yǎng)的溫度培養(yǎng)20-30分鐘。棄染色液，用PBS或培養(yǎng)液洗滌2-3次即可進(jìn)行熒光檢測(cè)。
北京諾博萊德科技有限公司位于北京市海淀區(qū)，是一家專(zhuān)業(yè)從事生化試劑、分子生物學(xué)試劑、實(shí)驗(yàn)耗材及實(shí)驗(yàn)儀器研發(fā)、銷(xiāo)售、服務(wù)為一體的生物科技公司，公司主要經(jīng)營(yíng)的進(jìn)口品牌包括Qiagen, Omega, Sigma, Invitrogen, Roche, Abcam, Santa cruz, Fermantas（MBI）, NEB, BD, Peprotech, Abnova, R&D systerms, GE, Biovision, Millipore, Amresco, Merck, CST, Axygen, Corning, NUNC, Thermo fihser, Eppendorf等；產(chǎn)品涉及化工原料、生化試劑、分子克隆相關(guān)試劑、細(xì)胞培養(yǎng)及檢測(cè)常用試劑、實(shí)驗(yàn)室常用耗材及儀器。
Hoechst 33258染色液 NobleRyder C0300
