羅氏蛋白酶K作用：

　　羅氏蛋白酶K在原位雜交技術(shù)中通常用于雜交前的處理，它具有消化包圍靶DNA蛋白質(zhì)的作用，以增加探針與靶核酸結(jié)合的機(jī)會(huì)，提高雜交信號(hào).但蛋白酶K的濃度過高、消化時(shí)間過長或孵育溫度過高時(shí)，都會(huì)對(duì)細(xì)胞的結(jié)構(gòu)有一定的破壞，導(dǎo)致組織切片的脫落，細(xì)胞核 的消失，從而影響雜交結(jié)果。EDTA緩沖液可以替代蛋白酶K的作用，解決上述出現(xiàn)的問題，并能達(dá)到理想的染色效果。

　　羅氏蛋白酶K的應(yīng)用比較廣泛，它可以消化包圍靶DNA蛋白，因此使用蛋白酶K能夠增加探針 與靶核酸結(jié)合的機(jī)會(huì)增強(qiáng)雜交信號(hào)，但在使用羅氏蛋白酶K時(shí)要主要使用的濃度，過高或者過低都會(huì)破壞細(xì)胞的結(jié)構(gòu)、核消失等影響試驗(yàn)結(jié)果。